Плодоводство
и виноградарство Юга России
Астапчук Ирина Леонидовна
Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Северо-Кавказский федеральный научный центр садоводства, виноградарства, виноделия»
лаборатория биотехнологического контроля фитопатогенов и фитофагов
младший научный сотрудник
Статьи в журнале (всего: 9)
С 2013 года в Краснодарском крае грибы рода Fusarium Link являются возбудителями гнили сердцевины плодов яблони, в 2019 году в составе патокомплекса выделено 7 видов этого рода. Для эффективного контроля заболевания, в патогенезе которого участвует большое количество видов, требуется проведение исследований in vitro. При этом необходимо добиться быстрого и гарантированного роста каждого из грибов. Известна значительная изменчивость морфологических и культуральных признаков фузариев при их культивировании под влиянием состава питательных сред. В связи с этим подбор для фузариевых грибов- возбудителей гнили сердцевины плодов яблони оптимальных для культивирования питательных сред является актуальным. Исследования выполнены методами лабораторного и сравнительного анализов. Изучали рост трех возбудителей гнили сердцевины плодов яблони рода Fusarium Link на 10 питательных средах. Оценивали радиальную скорость роста колонии и морфолого-культуральные признаки. В результате исследований у видов F. semitectum (Mart.) Sacc., F. sporotrichioides Sherb. и F. solani (Mart.) Sacc. установлено варьирование не только скорости роста колоний, но и их культуральных признаков в зависимости от питательной среды. Для культивирования изученных патогенных грибов были выделены морковный и томатный агары, как универсальные среды, на которых рост колонии в наших экспериментах был наиболее интенсивный. Дополнительно для каждого вида грибов предложены питательные среды: для F. solani – среда Мурасиге и Скуга; для F. semitectum – среда Мурасиге и Скуга и сусло-агар; для F. sporotrichioides – среда Ниренберга, картофельно-глюкозный агар и сусло-агар.
Для разработки защитных мероприятий необходимо выявлять наиболее Опасные и новые вредные объекты, а также осуществлять подбор препаратов, обладающих высокой эффективностью. Но не всегда оказывается возможным оценить эффективность ингибирования химическими препаратами конкретного вида гриба, кроме того, многие фитопатогены могут приобретать определенный уровень резистентности к фунгицидам. По этой причине возникает необходимость изучения эффективности препаратов в отношении отдельных видов с помощью лабораторных методов с использованием чистых культур грибов. Метод in vitro позволяет в достаточно короткие сроки оценить эффективность химических препаратов против возбудителей болезней. Однако, существует проблема отсутствия стандартизированного метода оценки антифунгальной активности в отношении экономически значимых патогенов сельскохозяйственных культур. Исследования выполнены двумя методами в зависимости от способа внесения препарата в среду: методом укола при равномерном внесении препарата на поверхность питательной среды и рассевом конидиальной суспензии патогена микробиологическим шпателем при внесении препарата на бумажных дисках. Антифунгальная активность химических препаратов в отношении гриба Alternaria alternatа возбудителя гнили плодов яблони различалась в широком диапазоне от отсутствия эффекта до сильной, но в большинстве вариантах опыта была средней и данные, полученные двумя методами изучения, были сопоставимы. Сопоставление данных двух методов, показало различную степень воспроизводимости результатов. Так наиболее стабильные и повторяющиеся результаты давал метод с равномерным внесением рабочей концентрации препарата на поверхность питательной среды и посевом методом укола. В нашем исследовании диско-диффузионный метод оказался более трудоёмким, а эффекты, полученные данным методом, характеризовались не всегда однозначной трактовкой и различались в повторностях, в сравнении с методом, в котором фунгицид вносился непосредственно на агаровую пластину, а посев осуществлялся уколом. Необходимо провести дальнейшую оптимизацию и стандартизацию этого метода, в том числе количество вносимого инокулюма гриба и толщину, и выровненность агаровой пластинки.
Развитие резистентности Venturia inaequalis к фунгицидам со специфическим механизмом действия ставит под угрозу эффективный контроль садов против парши яблони. Была изучена чувствительность популяции возбудителя парши яблони к ципродинилу в экспериментах «доза-эффект» для трёх популяций патогена из садов Краснодарского края. Одна из популяций была собрана в заброшенном саду и являлась исходной. Остальные популяции собраны в коммерческих садах с ежегодным использованием фунгицидов, в том числе и ципродинила. Определяли влияние 7 концентраций ципродинила: 0,001, 0,01; 0,10; 0,50; 1,00; 10,00 и 50,00 мг/л на рост моноспоровых изолятов патогена на синтетической среде Леру (Leroux). Всего проанализировано 63 изолята гриба. Рост мицелия на фунгициде выражали относительно контрольного варианта среды в процентах. Концентрацию действующего вещества фунгицида, которая приводила к двухкратному торможению роста, называемую эффективной 50 % концентрацией (ЭК50), находили с использованием пробит регрессионного преобразования величины относительного роста мицелия на действующем веществе. Анализ кривых «доза-эффект», показал горметические реакции при низких концентрациях фунгицида. По результатам исследования выявили, что чувствительность исходной популяции была значительно выше, чем в двух фунгицидных популяциях на уровне значимости p
В защите плодовых культур от комплекса патогенов одной из актуальных задач в настоящее время является предотвращение развития корневых гнилей, среди причин возникновения которых выделяют активность почвенных микромицетов Phytophthora sp. Селективные среды играют ключевую роль как в идентификации и последующем хранении в лабораторных условиях, так и в изучении морфолого-культуральных признаков, спорулирующей способности, а также для получения определенного количества инокулюма (например, для исследований in vivo) и мицелия (для выделения ДНК). Получение чистой культуры патогенного микромицета с определёнными морфолого-культуральными характеристиками, которые могут иметь значение для диагностики как традиционными, так и современными методами, обусловливает актуальность изучения влияния различных сред на эти показатели патогенного гриба Phytophthora sp. Исследования выполнены методами лабораторного и сравнительного анализов. Изучали рост штамма возбудителя корневой гнили яблони Phytophthora sp. на девяти питательных средах. Оценивали скорость роста колонии и морфолого-культуральные признаки. В результате исследований у штамма установлено варьирование не только скорости роста колонии, но и культуральных признаков в зависимости от питательной среды. Из девяти питательных сред выделены три универсальные, наиболее пригодные для культивирования и идентификации, а именно: томатный, картофельно-глюкозный и сусло-агары. Они отвечают следующим критериям: обеспечение максимальной степени спороношения, быстрый рост и развитие мицелия гриба, легкость в приготовлении. Также было отмечено, что для получения большого количества инокулюма можно использовать среду Leroux, так как при сплошном (газонном) посеве она даст больше спор, чем на других средах.