Тематический сетевой электронный научный журнал СКФНЦСВВ

Плодоводство
и виноградарство Юга России



Гвасалия Майя Валериановна

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Федеральный исследовательский центр «Субтропический научный центр Российской академии наук»
отдел биотехнологии растений
ст. научный сотрудник

кандидат биологических наук

Статьи в журнале (всего: 3)


pdf
691 Кб
9 с.
Размножение и производство посадочного материала (К 110-летию со дня рождения Г.В. Трусевича)
Дата публикации: 15.07.2020
УДК: 633.72:631.521
DOI: 10.30679/2219-5335-2020-4-64-210-218
Ключевые слова: РАСТЕНИЕ ЧАЯ, ЭКСПЛАНТЫ, МИКРОПОБЕГИ, ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА, ПРОТОКОЛ МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ, РЕГУЛЯТОРЫ РОСТА РАСТЕНИЙ

Реферат

В настоящем исследовании приведены данные экспериментов, которые направлены на оптимизацию протокола по использованию разных комбинаций фитогормонов (6-БАП, ГК3) на процесс умножения микропобегов чая в культуре in vitro. Субкультивирование проводилось с регулярными интервалами от четырёх до 16 недель (четыре субкультуры). При добавлении в питательную среду по прописи Мурасиге-Скуга регулятора роста БАП было установлено, что на количество произведенных побегов значительное влияние оказывала его концентрация – 3 мг/л. При повышении дозы до 5 мг/л фиксировалось ингибирование размножения, вследствие пролиферации каллусной ткани. В серии опытов с комбинацией различных концентраций БАП и ГК3 наблюдалось умножение микропобегов на всех вариантах, по сравнению с экспериментом, где присутствовал только один БАП. Лучший эффект от добавления ГК3 по среднему количеству полученных микропобегов отмечен на четвертой субкультуре с концентрацией БАП 3 мг/л + ГК3 0,5-1 мг/л (7-7,4 шт/экспл.) При этом гибберелловая кислота способствовала не только увеличению количества адвентивных микропобегов, но и их пролиферации в высоту, что может быть использовано не только для дальнейшей мультипликации и сокращения переходного периода к ризогенезу. Уменьшение выхода микропобегов с одного экспланта, удлинение их меристемы, изменение морфологии, появление признаков фасциации связано с использованием более высоких концентраций БАП (5-7 мг/л). По выходу зеленой массы с одного экспланта наблюдался разброс в результатах между различными комбинациями регуляторов роста. Самый большой вес зелёной массы (385 мг) был получен на среде МС + 5 мг/л БАП + 1 мг/л ГК3. Наличие БАП (7мг/л) + ГК3 (0,5-1 мг/л) способствовало нарастанию каллуса, что явилось причиной снижения веса зелёной массы.

Ссылка на статью
Гвасалия М. В. ПРОТОКОЛ МИКРОРАЗМНОЖЕНИЯ РАСТЕНИЙ ЧАЯ (CAMELLIA SINENSIS (L.) O. KUNTZE) IN VITRO [Электронный ресурс] // Плодоводство и виноградарство Юга России. 2020. № 64(4). С. 210–218. URL: http://journalkubansad.ru/pdf/20/04/17.pdf. DOI: 10.30679/2219-5335-2020-4-64-210-218 (дата обращения: 08.02.2023).
pdf
611 Кб
10 с.
Генетические ресурсы, сортоизучение, селекция
Дата публикации: 16.05.2022
УДК: 633.72.58.085
DOI: 10.30679/2219-5335-2022-3-75-97-106
Ключевые слова: ЧАЙ, СОМАКЛОНЫ, ЗАСУХОУСТОЙЧИВОСТЬ, ЭЛЕКТРОПРОВОДНОСТЬ, СТАБИЛЬНОСТЬ КЛЕТОЧНЫХ МЕМБРАН, ПЦР АНАЛИЗ, ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ

Реферат

Урожайность чайных плантаций, качество собранного сырья напрямую зависит от количества выпавших осадков, особенно в летний период. В связи с этим усилия ученых направлены на изучение физиологических, биохимических и молекулярных механизмов устойчивости растений чая к высоким температурам. Индукция стресса in vitro является альтернативным инструментом для глубокого изучения этих процессов. Для отбора засухоустойчивых генотипов мы имитировали in vitro дефицит влаги, путем добавления в питательную среду селективного агента – полиэтиленгликоля (PEG – 30 г/л). Осмотический стресс, изучался кондуктометрическим методом, по показателям электропроводности тканей и стабильности клеточных мембран. Из всей исследованной группы сомаклонов чая, только у сомаклона Sc-27 не происходило увеличения электропроводности тканей листа и снижения стабильности клеточных мембран, что указывает на его устойчивость к водному дефициту. У остальных растений по этим позициям, наблюдалось повреждение тканей, вызванное действием осмотического стресса. В протокол исследований также входило изучение уровня экспрессии гена дегидрин 2 – DHN2, как наиболее информативного генетического маркера засухоустойчивости. Проведенный ПЦР анализ показал, что при водном дефиците, вызванном добавлением PEG в питательную среду, ген дегидрин 2 (DHN2), показал высокий уровень экспрессии у сомаклона Sc-27. Это подтверждает прямую связь между действием осмотического стресса и уровнем экспрессии этого маркера. Значительно повышенная экспрессия гена DHN2 при добавлении ПЭГ подтверждает дефицит воды в микрорастениях чая, который является триггером для выработки DHN2. Таким образом, при индукции in vitro осмотического стресса, среди изученных сомаклонов чая, Sc-27 продемонстрировал высокую адаптивность к водному дефициту. Проведенный ПЦР анализ подтвердил это показав, что маркер засухоустойчивости – ген дегидрин 2 экспрессировался у него значительно выше.

Ссылка на статью
Гвасалия М. В. ИНДУКЦИЯ ОСМОТИЧЕСКОГО СТРЕССА IN VITRO В ЦЕЛЯХ ПОЛУЧЕНИЯ УСТОЙЧИВЫХ К ЗАСУХЕ ГЕНОТИПОВ ЧАЯ (CAMELLIA SINENSIS (L.) O. KUNTZE) [Электронный ресурс] // Плодоводство и виноградарство Юга России. 2022. № 75(3). С. 97–106. URL: http://journalkubansad.ru/pdf/22/03/08.pdf. DOI: 10.30679/2219-5335-2022-3-75-97-106 (дата обращения: 08.02.2023).
pdf
583 Кб
10 с.
Генетические ресурсы, сортоизучение, селекция
Дата публикации: 17.05.2021
УДК: 633.72:631.521
DOI: 10.30679/2219-5335-2021-3-69-76-85
Ключевые слова: ЧАЙ, СОМАКЛОНЫ, ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ИЗМЕНЧИВОСТЬ, SSR И ISSR ПРАЙМЕРЫ, ПОЛИМОРФИЗМ, КЛАСТЕР, СТРУКТУРА ПОПУЛЯЦИЙ

Реферат

В статье представлены результаты исследований по изучению изменчивости in vitro длительно культивируемых сомаклонов, полученных через каллусную культуру чая. Генетическое разнообразие протестировано с использованием SSR и ISSR праймеров. Более высоким уровнем полиморфизма отличились мультилокусные ISSR праймеры (40-52 %). Выявлено наличие генетических дистанций между сомаклонами и между каллусами, из которых они были получены, хотя коэффициент отличий был не столь значительным и составил 0,05–0,1. Все сомаклоны разделились на три кластера. Некоторые образцы оказались идентичными, с нулевыми различиями. Наибольшая изменчивость из всей группы обнаружена у образца №16. Анализ структуры популяции сомаклонов показал, что по частотам аллелей внутри исследуемой группы не имеется выраженных популяций. Индуцированная из каллуса чая изменчивость носит точковый характер. Все аллели распределились в образцах примерно в равных долях. Средние дистанции между образцами в популяциях (ожидаемая гетерозиготность) оказались примерно одинаковыми и частоты аллелей составили 0,57, поэтому все предполагаемые популяции попали в один общий кластер. Каллус чая также показал низкий уровень полиморфизма ДНК, и низкий процент генетических различий с сомаклонами, что подтверждает наличие точковой изменчивости. Отсутствовала коррелляция между конкретным сомаклоном и каллусом, из которого он был получен – кластеризация носила рандомный характер. SSR и ISSR анализ полногеномной ДНК показал, что амплифицированные SSR фрагменты отличались размером в пределах 10 пар нуклеотидов, гетерозигот в популяции детектировано не было. Структура популяции носила гомогенный характер с равным распределением частоты аллелей внутри популяции. В целом отмечен низкий процент генетических различий при сомаклональной изменчивости чая.

Ссылка на статью
Гвасалия М. В. ИЗУЧЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКОГО РАЗНООБРАЗИЯ IN VITRO СОМАКЛОНОВ ЧАЯ (CAMELLIA SINENSIS (L.) O. KUNTZE) МЕТОДАМИ SSR И ISSR АНАЛИЗА ПОЛНОГЕНОМНОЙ ДНК [Электронный ресурс] // Плодоводство и виноградарство Юга России. 2021. № 69(3). С. 76–85. URL: http://journalkubansad.ru/pdf/21/03/07.pdf. DOI: 10.30679/2219-5335-2021-3-69-76-85 (дата обращения: 08.02.2023).